7-10. 巨大DNAクローニング用ベクター
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通常の
プラスミドベクター
は、10~15 kb以上の
DNA
を組込ませることが難しいが、この問題を克服した、巨大DNAを
クローニング
できるプラスミドベクターがいくつかある
ただし、
真核生物
に多い
反復配列
が原因で
組換え
が起こり、
インサート
が不安定になるという現象が出やすい
YAC
(
yeast artificial chromosome
:
酵母人工染色体
)
出芽酵母染色体
の
ori
をもち、酵母細胞内でプラスミド状で増えるベクター
1,000 kb以上の巨大DNA断片を組込むことができるが、不安定
BAC
(
bacterial artificial chromosome
:
細菌人工染色体
)
F因子
の
ori
をもつプラスミドベクター
300 kb程度のDNAを組込める
細胞にほぼ1コピーしか存在しないため、安定
大きすぎるので、細胞に導入するには特別の工夫が要る
フォスミド
細胞導入における
BAC
の欠点をカバーする
PAC
(
P1-derived artificial chromosome
)
プラスミド
上で
溶原化
する
P1ファージ
の
ori
をもつ
100~300 kbの断片を組込める
コスミド